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    MDCK細胞培養技(jì )術，推動流感疫苗生産(chǎn)革新(xīn)
    發布日期：2024.09.03

    流行性感冒作(zuò)為(wèi)一種常見的疾病，至今不能(néng)被有(yǒu)效控制。尤其是在流感季節，大量人群需要接種流感疫苗以預防病毒感染。

    目前流感疫苗生産(chǎn)的主要原材料是雞胚，将病毒接種在十日齡孵化過程中(zhōng)的雞胚尿囊腔裏進行病毒繁殖。在養殖行業高度産(chǎn)業化的今天，用(yòng)雞胚來生産(chǎn)疫苗可(kě)以使成本壓到很(hěn)低。但用(yòng)雞胚生産(chǎn)最重要的問題是生産(chǎn)周期長(cháng)，也無法應對大流行（pandemic）的爆發。所以作(zuò)為(wèi)一種公(gōng)衛戰略，疫苗企業也在開發細胞基質(zhì)流感疫苗。其中(zhōng)，犬腎細胞MDCK以其培養容易、增殖快的特點，再加上α-2,6-和α-2,3-連接的唾液酸受體(tǐ)都暴露在MDCK細胞上[1]，并且它可(kě)以高效支持人和禽流感病毒的複制。因此，MDCK細胞成為(wèi)适用(yòng)于流感病毒疫苗生産(chǎn)的重要細胞系之一[2]。

     

    采用(yòng)生物(wù)反應器大規模動物(wù)細胞生産(chǎn)流感疫苗，是将病毒接種至種子細胞，并在生物(wù)反應器上大規模進行病毒繁殖以實現流感疫苗的規模化生産(chǎn)。MDCK是上皮樣細胞，通常是以貼壁方式生長(cháng)，近年也有(yǒu)懸浮馴化培養工(gōng)藝見于報道[3-4]。貼壁培養的規模化培養有(yǒu)幾種方式可(kě)以選擇，一種是從一種培養容器擴大到更大規模的培養容器，如從培養瓶擴大到細胞工(gōng)廠，但這樣放大規模有(yǒu)限；另一種是利用(yòng)微載體(tǐ)[5]或片狀載體(tǐ)[6]來提供超大的粘附面積，在反應器中(zhōng)實現“半懸浮”培養。全懸浮培養是MDCK細胞在無血清培養基中(zhōng)細胞在非貼壁狀态下懸浮培養。武漢賽科(kē)成提供各類生物(wù)反應器及片狀載體(tǐ)，支持不同規模及工(gōng)藝路線(xiàn)下疫苗的生産(chǎn)。

    MDCK_02.jpg

    細胞基質(zhì)流感病毒滅活疫苗免疫原性和安(ān)全性方面均優于雞胚基質(zhì)流感疫苗，對雞蛋過敏的人群也可(kě)以接種。因此，細胞基質(zhì)流感疫苗是未來流感疫苗的發展方向，也是有(yǒu)效應對禽／人流感大暴發流行的最快捷、高效的疫苗生産(chǎn)方式。在未來，我們期待通過生物(wù)反應器的廣泛應用(yòng)和培養體(tǐ)系的進一步優化，有(yǒu)望能(néng)實現更高密度、更大規模下的疫苗制備工(gōng)藝，實現中(zhōng)國(guó)本土疫苗産(chǎn)業的革新(xīn)氣象。

    參考文(wén)獻：

    [1] ki Y,Kawaoka Y.Enhanced expression of analpha2,6-linked sialic acid onMDCKcellsimproves isolation of human influenza viruses and evaluation of their sensitivity to a neuraminidase inhibitor[J].J Clin Microbiol, 2005,43(8): 4139-4146.

    [2] Tree JA, Richardson C, Fooks AR, et al. Comparison of large-scale mammalian cell culture systems with egg culture for the production of influenza virus A vaccine strains. Vaccine, 2001, 19: 3444−3450.

    [3] 武毓姝,孫偉洋,趙夢琳,等. B型流感疫苗候選株在MDCK懸浮細胞上培養工(gōng)藝優化研究[J]. 病毒學(xué)報,2024,40(2):283-292. DOI:10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004464.

    [4] 李樂凱,吳業紅,徐軍,遲祥,李爽,席莉,張雪(xuě)梅,郭占龍.生物(wù)反應器高密度無血清培養全懸浮MDCK細胞和流感病毒工(gōng)藝的建立[J].中(zhōng)國(guó)生物(wù)制品學(xué)雜志(zhì),2022,35(9):1082-1089.

    [5] 王石磊. (2012). 基于MDCK細胞培養的流感疫苗研究. (Doctoral dissertation, 上海交通大學(xué)).

    [6] 馬春英,王美皓. 動物(wù)細胞培養基質(zhì)片狀載體(tǐ)的研究及應用(yòng)進展[J]. 中(zhōng)國(guó)生物(wù)制品學(xué)雜志(zhì),2023,36(6):731-736,741.

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